克隆pcr产物如果没有回收到目的片段，还需要作什么对照实验？蛋白电泳仪
a）涂布未转化的感受态细胞
如有菌落，表明氨苄失效，或污染上带有氨苄抗型的质粒，或产生氨苄抗型的菌落
b）转化完整质粒，计算菌落生长数，测定转化效率
例如，将质粒:稀释,用于感受态细胞转化
用soc稀释到后，用铺板
培养过夜，产生个菌落
转化率为产生菌落的总数铺板dna的总量
铺板dna的总量是转化反应所用的量除以稀释倍数
具体而言转化用 dna，用soc稀释到后含dna，用铺板，共用dna
转化率为
克隆x（次方）铺板dna =（次方）
转化gem-t应用（次方）感受态细胞
如没有菌落或少有菌落，感受态细胞的转化率太低
c）
如用gem-t正对照，或pcr产物，产生;;-蓝斑（用指定步骤（次方）感受态细胞），表明载体失去t
可能是连接酶污染了核酸酶
t dna连接酶（m，m，m）质量标准好无核酸酶污染，不应用其它来源的t dna连接酶替换
d）
用gem-t或gem-t e载体，连接gem-t正对照，转化高频率感受态细胞（（次方））,按照指定的实验步骤，可得个菌落，其中%应为白斑，如产生;;-蓝斑,没有菌落或少有菌落，连接有问题
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